Molecular and epidemiological analysis of Babesiosis by Babesia bigemina in cattle from the Giron Municipality, Azuay, Ecuador

La babesiosis es una enfermedad causada por un protozoo intraeritrocítico Phylum Apicomplexa, clase Sporozoea, subclase Piroplasmea, superfamilia Babesioidea, familia Babesidae, género Babesia dentro del cual se destacan las especies Babesia bovis y B. bigemina en bovinos. Se presenta en las zonas tropicales y subtropicales del mundo y es transmitida principalmente por garrapatas Rhipicephalus microplus. Muestras de sangre completa fueron analizadas mediante frotis sanguíneos teñidos con Giemsa, PCR convencional para detectar, a partir del ADN en regiones variables del gen 18S rRNA, la banda de 393 pb correspondiente a B. bigemina, luego sometidas a la enzima de restricción Alu. I (secuencia de reconocimiento 5'AG↓CT3'), capaz de cortar el amplicón de ADN ribosómico de B. bigemina, generando tres fragmentos de 38, 144 y 211 pb. Para la amplificación por qPCR–RT se utilizó el kit qPCR diseño Primer específico de B. bigemina. Por punción de vena yugular se obtuvieron 100 muestras de bovinos pertenecientes a las Unidades de Producción Agropecuaria (UPA) de dos pisos geomorfológicos menor a 2, 200 msnm (bajo) y mayor a 2, 200 msnm (alto), Municipio Girón, callejón interandino de la República del Ecuador con ganado Holstein y Criollo Mestizo productor de leche. La garrapata R. microplus se detectó en el 100% de los animales evaluados. Con encuestas epidemiológicas se analizaron diferentes factores de riesgo locales asociados a babesiosis bovina, según los resultados obtenidos con cada una de las técnicas. Mediante frotis sanguíneo se identificaron 16 muestras positivas para B. bigemina, 7.54% en bajo y 25.53% en alto. Por PCR–RFLP 11 con 9.43% bajo y 12.76% alto. La qPCR-RT mostró una prevalencia mayor del 43% de B. bigemina, con un 54,72% en zonas bajas y un 29,79% en zonas altas. La altitud se asoció significativamente con la parasitemia en zonas altas, según la técnica de frotis con tinción de Giemsa. Se obtuvieron resultados diferentes con el kit de qPCR, que reveló una mayor parasitemia en zonas bajas, con baja carga vectorial, baños de garrapatas de menos de 60 días de duración y en invierno, cuando la presencia de B. bigemina aumentó significativamente.