Efecto de la dimetilformamida, glicerol y su combinación sobre la criosupervivencia y capacidad fecundante de espermatozoides equinos

Antecedentes: La combinación de agentes crioprotectores penetrantes (ACP), como el glicerol (GLY) y la dimetilformamida
(DMF), ha demostrado resultados promisorios en la criosupervivencia de espermatozoides equinos, al reducir los efectos
Deletéreos propios de la congelación. Sin embargo, la información respecto a su uso combinado aún es limitada. Objetivo: Esta investigación evaluó la cinemática, la integridad de membranas y la capacidad fecundante de espermatozoides equinos criopreservados con DMF (5%), GLY (5%) y su combinación DMF+GLY (3% + 3%). Metodología: Se recolectaron veinticuatro eyaculados de cuatro caballos árabes mediante vagina artificial (6/animal). Cada eyaculado fue diluido inicialmente con el diluyente Botusemen-Special® y posteriormente congelado con Botusemen-Gold® suplementado con DMF, GLY y DMF+GLY. Para la congelación se utilizaron pajuelas de 0,5 ml expuestas a vapores de nitrógeno líquido. La cinemática espermática y la integridad de membranas (plasmática y acrosómica) se evaluaron mediante un sistema CASA (SCA-Evolution® 2018) y una prueba fluorescente PI/PNA-FITC. La capacidad fecundante, basada en la formación de pronúcleos, se determinó mediante fecundación in vitro (FIV) heteróloga en cinco sesiones, empleando ovocitos bovinos madurados in vitro y espermatozoides equinos congelados con los tres ACP (DMF, n=258; GLY, n=214; DMF+GLY, n=240). El análisis estadístico se realizó con el software STATISTICA v.12.0 (StatSoft Inc., Tulsa, OK, USA), aplicando un ANOVA unidireccional y la prueba de Tukey. Resultados: La combinación DMF+GLY fue más efectiva en la protección de los espermatozoides, alcanzando valores significativamente superiores (P<0,05) de motilidad, velocidad curvilínea, velocidad rectilínea, frecuencia de batido del flagelo e integridad de membranas plasmática y acrosómica, en comparación con GLY y DMF. No obstante, no se observaron diferencias significativas en la capacidad fecundante entre los tres ACP (P>0,05). Conclusión: La combinación DMF+GLY mejoró de manera significativa la cinemática y la integridad de membranas, aunque la capacidad fecundante se mantuvo similar a la obtenida con GLY o DMF utilizados individualmente.